Eletroforese capilar
Eletroforese capilar é um método utilizado para separar e identificar fragmentos de DNA marcados com fluorescência, passando-os por capilares de pequena espessura.
01
Marcação com fluorescência
As amostras de DNA são marcadas com fluorescência e preparadas para a eletroforese.
A matriz capilar é preenchida com polímero específico e é colocada nos poços das amostras.
02
Entrada nos capilares
Quando a matriz capilar é colocada nos poços de amostra, forma-se uma corrente elétrica e os fragmentos de DNA movem-se para os capilares.
03
Cátodo e ânodo
Em seguida, as extremidades da matriz capilar são inseridas no cátodo e no ânodo.
O instrumento aplica uma voltagem e temperatura específicas para controlar a migração da amostra através da matriz capilar.
04
Separação por tamanho
Os fragmentos são separados por tamanho, sendo que os fragmentos mais pequenos movem-se mais rapidamente.
05
Excitação dos corantes
De seguida faz-se a deteção da amostra.
À medida que um fragmento rotulado com fluorescência se desloca pela janela de deteção, um laser excita os corantes fluorescentes.
06
Sequenciação dos nucleótidos
A luz emitida pelos nucleótidos é separada espectralmente e gravada por uma câmara.
A câmara regista a assinatura fluorescente de cada fragmento, bem como o tempo decorrido para que o fragmento migrasse através do polímero.
